De hemoglobine-haptoglobine Complexe test (HHKT) is een diagnostische methode die in de gastro-enterologie wordt gebruikt om intestinale (binnen orgaan) bloedingen op te sporen. Het basisprincipe van deze immunologische diagnostische techniek voor opsporing intestinale bloeding is gebaseerd op de biochemische eigenschappen van hemoglobine or haptoglobine (eiwit aanwezig in bloed plasma). Hierdoor toegenomen hemoglobine-haptoglobine complexen kunnen worden gedetecteerd in het darmlumen in geval van intestinale bloeding Detectie van deze complexen wordt vervolgens uitgevoerd met behulp van een ontlastingsmonster. De hemoglobine-haptoglobinecomplextest is van belang bij het opsporen van ziekten die verband houden met bloeding in het darmkanaal. Op basis hiervan aambeienauto-immuunziekten die de darm aantasten, of verschillende tumoren (intestinale poliepen; dikke darm kanker) kunnen worden gedetecteerd met de testmethode.
De procedure
Een belangrijke factor voor het succes bij het vroegtijdig opsporen van bijvoorbeeld tumoren in het darmgebied is de lage benodigde hoeveelheid bloed die met behulp van dit immunologische onderzoek in de ontlasting kan worden opgespoord. De hemoglobine-haptoglobinecomplextest en de hemoglobinetest worden uitgevoerd door middel van ELISA. ELISA staat voor Enzyme Linked Immunosorbent Assay en verwijst naar een immunologische detectiemethode waarbij de specifieke bindingsreactie tussen antilichamen en antigenen worden gebruikt om te visualiseren virussen, eiwitten or hormonen ELISA gebruikt de eigenschap van het specifieke antilichamen gebruikt dat ze binden aan de stof (antigeen) die moet worden gedetecteerd. Afhankelijk van de ELISA-test is het mogelijk om vooraf een antilichaam of antigeen te labelen met een enzym (potentieel actieve eiwitstructuur). De reactie die door het enzym wordt versneld, dient als bewijs voor de aanwezigheid van het antigeen. Het substraat (uitgangsmateriaal) wordt door het betreffende enzym omgezet, zodat vervolgens het reactieproduct meestal wordt gedetecteerd door een kleurverandering of door de aanwezigheid van fluorescentie. De sterkte van de kleurverandering is direct afhankelijk van de hoeveelheid antigeen in de putjes en dient dus tegelijkertijd voor de kwantitatieve beoordeling (beoordeling van de massa or concentratie aanwezig) van het testmonster. Het hemoglobine-haptoglobinecomplex wordt permanent intravasculair (binnenin bloed schepen) door het lekken van hemoglobine van veroudering erytrocyten (rode bloedcellen). In dit proces bindt het hemoglobine zich aan de β-subeenheid van α-haptoglobine (speciale structuur van haptoglobine). Dit complex wordt snel uit het bloed verwijderd door het reticulohistiocytensysteem. Het reticulohistiocytische systeem omvat alle fagocytische cellen (scavenger-cellen), die ook deel uitmaken van de cellulaire immuunrespons. Vanwege snelle eliminatie (verwijdering), de halfwaardetijd (tijd waarop de hoeveelheid wordt gehalveerd) van dit complex is ongeveer tien tot 30 minuten. Ter vergelijking: de halfwaardetijd van vrij haptoglobine is ongeveer vijf uur. Bij gezonde personen is het hemoglobine-haptoglobinegehalte minder dan twee microgram per milliliter bloed. Als deze waarde significant verhoogd is, is er een kans van 95% op intestinale bloeding Transport / opslag: transport binnen 24 uur, tussentijdse opslag in de koelkast (4 - 8 ° C) tot 1 dag mogelijk. Bij gebruik van speciale opvangsystemen is het materiaal 5 dagen houdbaar na monsterafname bij kamertemperatuur.
Indicaties (toepassingsgebieden)
- Aambeien - afhankelijk van het stadium van aambeien is het een klinisch relevant en mogelijk leidend tot symptomen vaatkussen.
- De ziekte van Crohn - chronische inflammatoire darmziekte.
- Colitis ulcerosa - in tegenstelling tot De ziekte van Crohn, kan colitis ulcerosa worden geïdentificeerd als een voortdurende verspreiding van inflammatoire infiltraten over de spijsverteringskanaal.
- Tumoren - de hemoglobine-haptoglobinecomplex-test dient hier als een specifieke en gevoelige methode voor het diagnosticeren van colorectale adenomen en carcinomen. Hier detecteert de hemoglobine-haptoglobinecomplextest verhoogde adenomen en wordt daarom vaak gecombineerd met de immunologische fecale hemoglobinetest, die gevoeliger en specifieker is voor dikke darm carcinomen.
Voordelen van de hemoglobine-haptoglobinecomplex-test.
- In tegenstelling tot andere detectiemethoden is de hemoglobine-haptoglobinecomplex-test minder gevoelig voor vitamine C en vlees, zodat er geen vervalsing van testresultaten kan zijn als deze eerder zijn geconsumeerd.
- Vanwege de hoge sensitiviteit (percentage zieke patiënten bij wie de ziekte wordt gedetecteerd door het gebruik van de test, dwz er treedt een positief testresultaat op) en specificiteit (waarschijnlijkheid dat daadwerkelijk gezonde mensen die de ziekte in kwestie niet hebben, ook worden gedetecteerd) zo gezond in de test) van deze immunologische methoden, vertegenwoordigt de methode het middel bij uitstek voor een detectie van bloed in de ontlasting, aangezien het zowel eenvoudig uit te voeren is als klinisch zinvolle resultaten kan opleveren.
- Verder heeft deze methode het voordeel dat de patiënt geen special hoeft te volgen dieet Dit voordeel vloeit voort uit het feit dat immunologische methoden uitsluitend werken volgens het principe van zeer specifieke binding antilichamen.
- Immunologische testmethoden op basis van de specifieke detectie van hemoglobine in ontlasting hebben een significante toename in gevoeligheid en specificiteit in vergelijking met andere immunologische testmethoden. In verschillende klinische onderzoeken is aangetoond dat deze immunologische test ongeveer 95% van dikke darm carcinomen (colorectale kankers) en 70% van colon poliepen (weefseluitsteeksels in het lumen van de dikke darm; sommige soorten dikke darmpoliepen zijn precancereuze laesies voor coloncarcinoom). Een nadeel is bacteriële afbraak van hemoglobine in de darm, wat kan resulteren in vals-negatieve waarden in oudere (> 24 uur) ontlastingsmonsters.
Nadelen van de hemoglobine-haptoglobinecomplex-test.
- Bij het evalueren van de immunologische methode moet worden opgemerkt dat bacteriële afbraak van hemoglobine in de darm plaatsvindt. Hierdoor bestaat de mogelijkheid van vals-negatieve waarden bij oudere (meer dan 24 uur oude) ontlastingsmonsters.
Interpretatie
Een positief testresultaat vereist endoscopisch onderzoek van de gehele dikke darm (colonoscopie Colonoscopische opwerking moet binnen 31 dagen worden uitgevoerd volgens een Europese kwaliteitsrichtlijn. Evaluaties door Kaiser Permanente's Research Institute van patiënten met een positief testresultaat toonden aan dat het risico van darmkanker wordt gedetecteerd tijdens colonoscopie elke maand met 3% verhoogd. Een significant verhoogde tumorsnelheid (vergeleken met patiënten die een colonoscopie afspraak in de eerste maand) werd pas gezien na een vertraging van 10 maanden bij de colonoscopie.
