Immuno-elektroforese wordt gebruikt voor laboratoriumdiagnostische opsporing van monoklonaal antilichamen bij een patiënt bloed Monoklonaal antilichamen zijn afgeleid van dezelfde cel en gericht tegen dezelfde antigenen. Om deze reden worden ze als pathologisch beschouwd en suggereren ze, wanneer ze worden ontdekt, ziekten zoals de ziekte van Waldenström.
Wat is immuno-elektroforese?
Immuno-elektroforese wordt gebruikt voor laboratoriumdiagnostische opsporing van monoklonaal antilichamen bij een patiënt bloed Ionen hebben differentiële mobiliteit. Deze differentiële mobiliteit vormt de basis van elektroferese methoden. Deze methoden scheiden verschillende stoffen van elkaar met behulp van elektrische velden en zwaartekracht. Een bekende methode uit het veld is immuno-elektroferese. Dit is een kwalitatieve diagnostische procedure die wordt gebruikt om te detecteren monoklonale antilichamen Antilichamen zijn immunologisch actieve eiwitstoffen van een specifieke cellijn. Monoklonale antilichamen alle zijn afkomstig van dezelfde B-lymfocyt en zijn dienovereenkomstig gericht tegen een enkele epitoop. Elke natuurlijke immuunrespons tegen binnendringende antigenen komt overeen met een polyklonale respons en is dus gericht tegen verschillende epitopen. Een monoklonale immuunrespons levert daarom het bewijs van pathologische lichaamsprocessen. Monoklonale antilichamen anders binden moleculen met hoge specificiteit. Deze binding kan worden gedetecteerd door immuno-elektroforese De methode is een kwalitatieve diagnostische procedure in het laboratorium en bestaat uit twee soorten procedures: serumelektroforese en immunodiffusie.
Functie, effect en doelstellingen
Immuno-elektroforese combineert de methodologie van serumelektroforese met immunodiffusie. Het serum van de patiënt wordt op een agarosegel of celluloseacetaatfilm geplaatst. Er wordt ook een controleserum aangebracht. De toepassing wordt gevolgd door elektroforetische scheiding van de monsters. Antisera, IgG, IgA, IgM, azijnzuur voor normale elektroforese en kappa, en lambda worden toegepast tussen de scheidingslijnen. Dit zet een reactie op met de antilichamen van het patiëntenserum, waardoor neerslaglijnen ontstaan. Afhankelijk van het gebruikte antiserum en de positie en vorm van de afzonderlijke lijnen kunnen conclusies worden getrokken over de immunoglobulinen met kappa- of lambda-lichte ketens. In het geval van een lambdaband zijn vrije lichte ketens van antilichamen aanwezig. Met behulp van de zeldzame IgE en IgD levert het laboratorium aanvullend bewijs dat een nauwkeurige bepaling van de immunoglobulinen Een procedure van immunodiffusie-elektroforese vindt plaats volgens Pierre Grabar en Curtis Williams en komt overeen met een combinatie van agarosegelelektroforese van eiwitten en een diffusie van antilichamen. Ten eerste vindt agarosegelelektroforese plaats. Vervolgens diffunderen de aanwezige antilichamen tegen de banden van antigenen en veroorzaken daardoor precipitatiebogen. Dit moet worden onderscheiden van Laurell's Rocket-immuno-elektroforese, die overeenkomt met elektroforese van eiwitten in een agarosegel, die elk antilichamen bevatten op een specifiek concentratie De gel bevat een enigszins basische buffer die alleen de antigenen laat migreren, waardoor de meeste antilichamen naar het iso-elektrische punt worden geduwd door blootstelling aan de enigszins basische pH totdat ze niet meer elektroforetisch bewegen. Aan het begin van een Rocket-immuno-elektroforese is er een overmaat aan antigeen, dus worden oplosbare antigeen-antilichaamcomplexen gevormd. Tijdens elektroforese vindt extra binding plaats tussen antigenen en aanvullende antilichamen. Op het equivalentiepunt worden op deze manier immunoprecipitaten gevormd, die lijken op raketachtige figuren met een hoogte evenredig met het antigeen concentratie De hoogte van het neerslag wordt gemeten om de test te evalueren.
Risico's, bijwerkingen en gevaren
De detectie van monoklonale antilichamen is vooral belangrijk voor de diagnose van multipel myeloom en de ziekte van Waldenström. De verkregen detectie wijst op een kwaadaardige degeneratie van immuuncellen. Multipel myeloom komt overeen met a kanker van de beenmerg gekenmerkt door de kwaadaardige proliferatie van antilichaam-producerende cellen in het plasma. Deze plasmacellen produceren antilichamen en hun fragmenten. Kwaadaardige plasmacellen zijn altijd afkomstig van een gemeenschappelijke stamcel en zijn dus genetisch identiek. Ze produceren uitsluitend monoklonale antilichamen. De maligniteit van deze ziekte kan overeenkomen met een precancereus stadium, maar kan ook een zeer kwaadaardig stadium bereiken dat zonder behandeling snel dodelijk is. Ziektesymptomen zijn het gevolg van de kwaadaardige groei van de cellen of van de antilichamen en antilichaamfragmenten. De meest voorkomende symptomen zijn onder meer bot pijn, botoplossing en spontane botbreuken. Calcium niveaus in de bloed zijn vaak verheven. Bovendien nestelen de abnormale antilichamen zich vaak in de weefsels en veroorzaken orgaandisfunctie, wat kan leiden tot manifestaties zoals nier mislukking of verminderde bloedstroom. De ziekte van Waldström is ook een kwaadaardige tumorziekte. Meer specifiek is het een kwaadaardig lymfoom ziekte die is geclassificeerd als een langzaam progressieve en bijna asymptomatische B-cel niet-Hodgkin-lymfoom In de meeste gevallen kunnen abnormale producties van monoklonaal IgM bij de ziekte worden gedetecteerd, die het gevolg zijn van activiteiten van de kwaadaardige lymfoom cellen. De ziekte van Waldenström lijkt qua kenmerken sterk op multipel myeloom, maar vertoont gewoonlijk een gunstiger verloop. De meeste patiënten met de ziekte van Waldenström zijn grotendeels asymptomatisch tot aan de diagnose. Andere patiënten vertonen vroege symptomen zoals niet-specifiek 피로 of perifere neuropathieën die het gevolg zijn van de afzetting van monoklonaal IgM binnen de myeline schede Zelfs kleine hoeveelheden IgM kunnen dit veroorzaken polyneuropathie Bij andere patiënten polyneuropathie komt niet voor, zelfs niet bij hoge niveaus. Bovendien kunnen niet-specifieke symptomen zoals koorts, ongewenst gewichtsverliesof nachtelijk zweten kan optreden. Botpijn is ook kenmerkend. Door de overproductie van IgM wordt het bloed hyperviscus, zodat bovenstaande symptomen kunnen samenhangen met die van een hyperviscositeitssyndroom. Dit bloedingsneiging manifesteert zich in de meeste gevallen frequent neusbloedingen, hoofdpijneen algemeen gevoel van malaise of wazig zien en akoestische klachten. Om maligniteiten van dit type op te sporen, is immuno-elektroferese al lang een standaard diagnostische procedure geworden.
