Fasecontrastmicroscopie

Fasecontrastmicroscopie is een onmisbare diagnostische procedure in de gynaecologie die het onderzoek van vitale cellen in baarmoederhalsslijm (baarmoederhalsslijm) en vaginale afscheidingen (vaginale vloeistof) aanzienlijk vergemakkelijkt. Bovendien maakt deze procedure ook de evaluatie van sperma (spermacellen).

Indicaties (toepassingsgebieden)

  • Diagnostiek van vaginale flora - bij onderzoek van de vaginale flora (vaginale flora) zijn de volgende onderzoeken mogelijk met fasecontrastmicroscopie: bijvoorbeeld de diagnose van een gebrek aan bacteriële kolonisatie of een normale vaginale flora (melkzuur bacteriën) met of zonder cytolyse (celvernietiging) kan worden gemaakt met behulp van deze diagnostische procedure. Bovendien is het mogelijk om te identificeren bacteriën bij de bereiding en om ze in te delen in de groepen van immobiele en beweeglijke bacteriën. Bovendien kunnen flagellaten zoals Trichomonas vaginalis, die tot de groep parasieten behoren, meestal betrouwbaar worden gedetecteerd door de fasecontrastmicroscoop. Bovendien mycosen (schimmelziekten) betrouwbaar worden gedetecteerd in fasecontrastmicroscopie, zodat de diagnose van spruwmycose kan worden gesteld met behulp van fasecontrastmicroscopie. Op basis van deze diagnostische mogelijkheden is de detectie van een infectieuze cervicale oorzaak van steriliteit meestal mogelijk.
  • Ontstekingsmarkers - door fasecontrastmicroscopie, het aantal en het type leukocyten (leukocytenmorfologie) kan worden bepaald.
  • Cyclusfasebepaling - vaginale cytologie wordt gebruikt om de cyclusfasen van de menstruatiecyclus te bepalen. In deze onderzoeksstap worden oppervlakkige (oppervlakkige) cellen van de vagina (vagina) microscopisch onderzocht. Het celonderzoek geeft informatie over de huidige fase van de menstruatiecyclus van de vrouw.De vrouwelijke cyclus is verdeeld in twee fasen, de eerste fase heet de folliculaire fase (eierrijpfase) en de tweede cyclusfase heet de corpus luteumfase (corpus luteum fase). Wel dient opgemerkt te worden dat de cyclusfasebepaling door middel van fasecontrastmicroscopie nu grotendeels is vervangen door hormoondiagnostiek, wat een hoge mate van diagnostische zekerheid garandeert.
  • Sims-Huhner-test - deze testprocedure, die ook wel de postcoïtale test wordt genoemd, wordt gebruikt om te bepalen of sperma (zaadcellen) kunnen het baarmoederhalsslijm (baarmoederhalsslijm) binnendringen om de plaats van bevruchting te bereiken.
  • Beoordeling van sperma - naast het beoordelen van het vermogen van sperma om het baarmoederhalsslijm te penetreren (passeren), kan fasecontrastmicroscopie ook het aantal zaadcellen, hun beweeglijkheid en morfologie (uiterlijk) onderzoeken.
  • Uitstrijkje - in geval van verdenking, bijvoorbeeld mycose (schimmelziekte), bestaat de mogelijkheid van een uitstrijkje van de vagina (vagina) of vulva (het geheel van de externe primaire geslachtsorganen van een vrouw. vleien en clitoris) of mogelijk uit het anale gebied om microscopisch te nemen en te evalueren.

Bereiding van fasecontrast-microspie met behulp van het voorbeeld van de evaluatie van de aanwezige vaginale secretie:

  • Aan het begin van de beoordeling van vaginale afscheidingen door een fasecontrastmicroscoop, wordt de bereiding van twee geschikte natuurlijke preparaten (verse, niet-gefixeerde, meestal ongekleurde bereiding van lichaamssappenweefsels of orgaaninhoud voor microscopische detectie van levende pathogenen) moeten worden gemaakt.
  • De toevoeging van kalium hydroxide-oplossing (KOH) en keukenzout naar de vaginale afscheiding wordt uitgevoerd. Nadat het mengen is voltooid, wordt de gecombineerde afscheiding op een glaasje aangebracht en bedekt met een dekglaasje. Vervolgens kan de fasecontrastmicroscopische beoordeling worden gemaakt.

De procedure

Het principe van fasecontrastmicroscopie is gebaseerd op de interferentie van lichtstralen in het straalpad van de microscoop, waardoor een contrastrijk beeld van ongekleurde cellen kan worden verkregen. Opbouw en functie van de fasecontrastmicroscoop:

  • De ringvormige opening, condensor, ringvormige faseplaat en objectief zijn bijzonder belangrijk voor de functie van de fasecontrastmicroscoop. Door de ringvormige opening in de condensor te plaatsen en de faseplaat in het objectief, wordt een scheiding van niet-afgebogen en afgebogen lichtbundels veroorzaakt. De resulterende vertraging in de golflengte van de afgebogen lichtstralen veroorzaakt een faseverschil dat optisch de structurele details bepaalt van het microscopisch te onderzoeken object donkerder dan het omringende medium. Fysiek is de fase bloedplaatjes zet de fase- of padverschillen om in amplitudeverschillen. Als resultaat van deze amplitudeverschillen verschijnt het beeld van het object in de microscoop door wederzijdse annulering of versterking van de directe lichtstralen die door het object gaan en naar het object worden afgebogen.
  • Een nadeel van dit principe is dus het feit dat ideale fasepreparaten niet de regel zijn, aangezien amplitude-effecten meestal worden gesuperponeerd op de fase-effecten.
  • Gebaseerd op het principe van het afbeelden van de structuren door amplitudeverschillen, worden de bestaande celstructuren weergegeven als gegradeerde grijstinten, afhankelijk van hun eigen optische dichtheid​ Om de reproductie van de structuren te verbeteren, het gebruik van dunne preparaten en fase bloedplaatjes wordt aangeduid. Afhankelijk van de aard van de verschillende fasen bloedplaatjeskunnen zowel positieve als negatieve fasecontrasten worden bereikt, waardoor de interessante objecten donkerder of lichter worden gemaakt dan hun omgeving.
  • Bij fasecontrastmicroscopie is het ook belangrijk om dat op te merken necrose (afsterven van cellen) kan relatief snel optreden door blootstelling aan licht en bijkomende schade aan de vitale cellen. Als gevolg van deze snelle necrose ontwikkeling, moet de beoordeling van de dia's binnen één tot twee uur worden uitgevoerd om de deugdelijkheid van de diagnostische maatregel. Deze tijdsbeperking voor de evaluatie van vitale monsters vereist dus meestal documentatie door microfotografie of, indien nodig, door microkinematografie uit te voeren. Een microfoto is een foto van een microscopisch beeld gemaakt met een camera die aan een microscoop is bevestigd. Door middel van microkinematografie bestaat de mogelijkheid om objecten onder microscopische observatie vast te leggen in bewegende beelden.

Voordelen van fasecontrastmicroscopie:

  • Onmiddellijke diagnose - tijdbesparend en goedkoop uit te voeren.
  • Relatief eenvoudig uit te voeren en daarom snel leerzaam en leerbaar.
  • Afhankelijk van de ervaring van de onderzoeker met relatief goede sensitiviteit (percentage zieke patiënten bij wie de ziekte wordt opgespoord door toepassing van de procedure, dwz er treedt een positieve bevinding op) en specificiteit (kans dat daadwerkelijk gezonde mensen die niet lijden aan de ziekte in kwestie worden ook gedetecteerd als gezond door de procedure) getroffen
  • De diagnose is mogelijk zonder hulp van buitenaf (dwz zonder een extern laboratorium).