Bevroren sectie-analyse
Dit is nodig als de chirurg informatie nodig heeft over het weefsel dat tijdens een operatie is verwijderd om te beslissen over het verloop van de procedure. Er wordt bijvoorbeeld een kleine kwaadaardige tumor verwijderd uit de nier. Nu is een snelle incisie nodig om te zien of de tumor volledig is verwijderd of dat er nog enorme hoeveelheden kwaadaardig weefsel aan de randen van de weefselmonsters zijn.
De uitkomst van het vriescoupeonderzoek bepaalt uiteindelijk het verloop van de operatie en het verdere therapieplan van de patiënt. Hoe werkt een bevroren sectieonderzoek? Binnen 10 minuten is het weefsel gestabiliseerd door bevriezing bij -20 ° C, waarna een incisie van 5 - 10 μm dik wordt gemaakt op het zogenaamde microtoom. Dit wordt op een dia, een kleine glasplaat geplaatst en snel gekleurd. Aan het einde worden de bevindingen onder de microscoop onderzocht en kan het resultaat direct naar de operatiekamer worden doorgestuurd.
Kleuringsmethoden
Veel histologische kleuringsmethoden zijn ontwikkeld in de afgelopen 120 jaar. De celstructuren en weefsels worden op basis van de kleurreactie met de kleurstoffen verdeeld in basofiele, acidofiele en neutrofiele cellen. Verder zijn er ook agyrofiele en nucleofiele structuren.
Basofiel kleurt alles wat een zuurgroep bevat en wordt gekleurd met een basische kleurstof (bijvoorbeeld hematoxyline of methyleenblauw). Structuren die acidofiel zijn, zijn basisch en kunnen daarom worden gekleurd met erosie of zure fuchsine (zure kleurstoffen). Deze omvatten het cytoplasma en collageen vezels.
Neutrofiele of lipofiele componenten kunnen niet reageren met een zure of basische kleurstof en kunnen daarom niet worden gekleurd. Agyrofiele componenten kunnen zilverionen binden en deze omzetten in elementair zilver. Een nucleofiele (nucleus = celkern, celkernminnende) kleurreactie is het resultaat van nucleofiele kleurstoffen in de celkernDit zijn DNA-bindende of basische stoffen die binden aan nucleïnezuren.
Tegenwoordig zijn de beproefde chemische kleuringsmethoden aangevuld met immunologische methoden. De antigeen-antilichaam-reactie wordt in deze techniek gebruikt om bepaalde celeigenschappen te detecteren. De reactie kan vervolgens zichtbaar worden gemaakt met een geavanceerde techniek.
Veelgebruikte kleuringsmethoden zijn: HE-kleuring = hematoxyline-eosine-kleuring: hematoxyline, een natuurlijke kleurstof, kleurt alle structuren blauw, die basofiel (= base-liefhebbend) en daarom zuur zijn, zoals DNA, celkernen, ribosomen, enz. Eosine, aan de andere kant, wordt synthetisch geproduceerd. Eosine kleurt alle celstructuren rood als ze acidofiel (= zuurminnend) of basisch zijn.
De eiwitten van het cytoplasma, mitochondria en collageen behoren tot hen. Azan-kleuring: Het is samengesteld uit de eerste letters van beide kleuren, azokarmijn G en aniline blauw-goudoranje: dit kleurt de celkern en spiervezels rood en het cytoplasma roodachtig. Collageen en reticulaire vezels worden blauw bij deze kleuring.
De Giemsa-kleurstof (Giemsa's Azure-Eosine-Methyleenblauw) wordt gebruikt om te kleuren bloed cel uitstrijkjes. Celkernen zijn gemakkelijk te herkennen aan de paarse kleurreactie. Het cytoplasma wordt blauwachtig.
Bij de elastica-kleuring (resorcinol-fuchsin-orceïne) worden alle elastische vezels in zwart-violet weergegeven. De van Gieson-kleuringsmethode kenmerkt zich door het feit dat de kleuring eerst wordt uitgevoerd met hematoxyline. Vervolgens wordt picrinezuur fuchsine (micro fuchsine) of picrinezuur thiazine gebruikt.
Uiteindelijk zien de celkernen er zwart-donkerbruin uit, het cytoplasma lijkt eerder lichtbruin. Tegenkleuring met picrinezuur thiazine kleurt de elastische vezels en spierweefsel oranjegeel en de collageenvezels rood. Bij trichroomkleuring volgens Masson-Goldner is de grootte van het kleurstofmolecuul de belangrijkste factor in de kleuringsmethode.
Er wordt ijzerhematoxiline gebruikt, meestal met drie extra kleurstoffen, namelijk zure vos, oranje G en lichtgroen. Het kleurt collageen bindweefsel en slijm groen, celkernen blauw-zwart, cytoplasma rood, spieren bleek rood en rood bloed cellen (erytrocyten) Oranje rood. Bovendien is er een Gram-kleuring, die dient om te differentiëren bacteriën.
Gram-positieve bacteriën zijn blauw gekleurd en gramnegatieve bacteriën zijn rood gekleurd. Ziehl-Neelsen-kleuring wordt ook gebruikt voor bacteriën, namelijk die welke zuurbestendig zijn en bijvoorbeeld shows tuberculose ziekteverwekkers in het rood. Andere kleuringsmethoden die hier moeten worden vermeld, zijn de Berlin-Blue-reactie, die verantwoordelijk is voor de detectie van driewaardige ijzerionen in weefselcoupes, en de ijzerhematoxyline-kleuringsmethode volgens Heidenhain.
