Enkel-gen analyse is een gerichte genetische testmethode.
In het kader van deze procedure, als een erfelijke ziekte wordt vermoed die wordt veroorzaakt door een eenmalige verandering in a genwordt het gen waarvan wordt vermoed dat het oorzakelijk is, onderzocht. Dit wordt ook vaak routinematig gedaan als onderdeel van screeningonderzoeken.
Indicaties (toepassingsgebieden)
- Diagnose van monogene ziekten, bijv taaislijmziekte.
De procedure
Materiaal nodig
- Heparinebloed (minimaal 1-2 ml)
Voorbereiding van de patiënt
- Niet nodig
Storende factoren
- Geen bekend
De laboratoriummethode
Meestal is de sequentiemethode die wordt gebruikt ingen analyse is de Sanger-methode, ook wel ketenbeëindigingssynthese genoemd, waarbij het eerst gaat om de isolatie van DNA uit de bloed Dan allemaal waterstof bindingen die dienen om het tweestrengs DNA bij elkaar te houden, zijn verbroken. Na een minuut verwarmen op 94-96 ° C zijn er twee enkele strengen aanwezig. Vervolgens vindt de zogenaamde primerhybridisatie plaats, waarbij een primer wordt bevestigd. Dit vindt plaats bij ongeveer 60 ° C. Een primer is een oligonucleotide (oligomeren samengesteld uit enkele nucleotiden) die dient als uitgangspunt voor DNA-replicatie enzymen zoals DNA-polymerase. Na primerhybridisatie vindt verlenging plaats, waarbij de temperatuur wordt verhoogd tot 72 ° C. Hierdoor kan de primer zich hechten aan het DNA-polymerase (enzymen die DNA synthetiseren). Na gemiddeld 30 cycli kan de procedure worden gestopt.
Verdere analyse wordt uitgevoerd door capillair elektroforese in geautomatiseerde sequencers. Het resultaat wordt een elektroferogram genoemd. Dit toont verschillende kleuren die de basisvolgorde aangeven.
Met deze methode kunnen mutaties waarbij slechts één nucleïnezuurbasis in een gen betrokken is, ook bekend als puntmutaties, worden gedetecteerd.
